製品説明

本製品はヒト末梢血由来のPBMC(Peripheral Blood Mononuclear Cells)から選択的にNK細胞を効率的かつ簡便に培養するキットです。

KBM NKCC-ｂ(培養バッグ)
KBM NKCC-ｃ(コーティング剤)
KBM NKCC-1(初代培養用培地)
KBM NKCC-2(拡大培養用培地)
から構成されています。

使用マニュアルを参照の上ご使用ください。

特長

培養10日で100~150倍程度(最大36億細胞程度)に細胞を増殖させることが可能であり、そのうちの50%以上がNK細胞となることが分かっています(※)。
※個人差により、稀にNK比率が50%を超えないこともあります。

培養例

１．PBMC 2.0E+07細胞をコーティングしたT75フラスコへ播種（NKCC-1 20 mL,血清 2 mL添加） 37℃、5%CO2インキュベータにて静置培養。

２．培養5日後、細胞数が8.2E+07細胞となっていた所で回収。拡大培養へ移行（1200 rpm×5 min）

３．細胞濃度が4.0E+05 細胞/mL程度になるように200 mLのNKCC-2を添加。その際、PBMC分離時に取得した。ヒト血清を非働化(56℃,30 min)して添加（10 mL）

４．培養7日後、培養液が黄色く変色したのを確認し、残りのNKCC-2を800 ｍLをバッグに添加。

５．培養10日後、細胞数をカウントし、フローサイトメーターにて細胞表面マーカー(CD56,CD3)の確認およびK562(標的癌細胞)を使用した細胞障害活性の測定。

◆マニュアルはこちらをご覧下さい。